色谱柱的选择
液相柱:进口柱:agilent、waters、岛津等,价格较贵。waters的口碑最好。
国产柱:大连依立特,北京迪马,价格实惠公道。作为一般常用的C18柱,国产柱子都能满足规定的要求,柱寿命也较长。如要进行高pH的操作,最好购买进口柱。
一般进口的质量要好一点,但价格相对较贵,我一般用Waters的,感觉比较好。
需要注意的是,氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18、C8柱的键合官能团C18、C8要容易水解,所以首先要做好其常规使用的寿命稍逊的心理上的准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。反相条件下使用时,要格外的注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。
有一种情况是,当使用氨基柱进行酸性物质如果汁的分析时(分析其中的糖份),酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。这时,Kromasil专家所给的建议是:用5~10倍的柱体积的含0.5~1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再做多元化的分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。
氨基柱的清洗:简单说起来,正相条件下使用的氨基柱你就参照硅胶柱的清理洗涤方法;反相条件下使用的氨基柱你就参照C18的清洗方法。
是正相柱通常用于正相色谱,但又可用于反相色谱(即是正相柱用反相条件)。其在用于正相色谱时,可用如正己烷等低极性流动相,在用于反相色谱时,可使用甲醇或水的强极性流动相。在反相色谱中疏水性相比来说较低,并且由于具有腈基,与ODS(反相)比较有不同的选择性。作反相用时适用于在ODS上分离时间太长的组分的分离。正相条件下使用的冲洗方法:正相条件下使用你就参照硅胶柱的方法;反相条件下使用你就参照C18的方法。
属于正相色谱,反相色谱都可以用,多用于含苯基的物质,属于专用柱子。其在用于正相色谱时,可用如正己烷等低极性流动相,参照对应的硅胶柱,在用于反相色谱时,可使用甲醇或水的强极性流动相,参照对应的C18柱子。冲洗方法同氰基柱。