质谱仪原理简介

  B、串联质谱进行母离子、中性丢掉 扫描，剖析含HPO3的肽段发生的特 征离子，直接从混合肽段中找出磷酸 化肽段。

  C、PRD-MALDI-MS 用源后衰变技能寻觅质量数少80Da 或98Da的肽段来判别磷酸肽。

  a 公式界说为单峰的质荷比与其半峰宽之比 b公式界说为相邻的相交10％的两个峰M₁ M₂

  经过测部分氨基酸序列，结合此序列前后的 离子质量和肽段母离子质量进行数据库检索， 称为肽序列标签技能。

  A、用糖甙内切酶堵截糖链与蛋白链间的 糖甘键，将反响前后的质谱图比较，可 知糖链的均匀质量。

  先用蛋白酶酶解成含糖链和不含糖链的 肽段，取得其肽质量指纹谱，再用糖苷 内切酶切除糖链，其肽质量指纹谱将发 生改变，含糖肽段发生丢掉位移，经过 网上数据库检索其序列，找到位点。

  蛋白酶解时，酶解液中H218O和H216O各占50％， 酶解后肽段的羧基端上的羟基1氧8 O16/ O丰度比1： 1，使Y型离子系列的M2/M同位素峰的丰度高 于正常未符号18O的离子的同位素丰度比。

  ▪ MALDI源的呈现处理了生物大分子的离子化难题， 离子化进程与FBI有相似之处。

  1、分辨率低。 2、1000Da以下基质峰搅扰。 3、激光解吸附离子化有可能使样

  5、不能剖析非共价键相互作用。 6、定量时需求内校准。 7、如没有反射飞翔设备，不能分

  第一节：质量剖析器的首要目标 A、质量规模（ｍ/ｚ） 所能丈量的质荷比规模 [MnH]ⁿ⁺

  •可判定极点具有pI、疏水性、分子量的蛋白质 •合适膜蛋白 •重复性好 •简单自动化 •上样量大 •高灵敏度（溶液酶切） •可依据样品灵敏装备（但终究一维一般为RP）

  磷酸肽或磷酸化蛋白在缄性环境下发 生β消除，一同用亲核试剂进犯构成 的双键并发生加成反响，亲核试剂一 种为氘原子、一种为氢原子，再接上 一个亲和标签（如生物素biotin）， 混合酶解，提取含biotin的肽段进行 MS检测。

  1、 ESI发生的生物大分子离子如多肽蛋白等常常带 10个以上电荷，使得m/z大大减小，弥补了四极杆质 量剖析器等质量规模窄的缺陷。

  2、质谱图显现的是离子带不同电荷数的一系列质荷 比峰，依据峰方位换算成质量数和电荷数。

  ▪ 对基质的要求是能吸收337nm紫外光并气化，能量 由基质传给样品使样品一同气化并离子化。

  4000v强电场中，样品溶液经过毛细管喷嘴喷出，带 电液滴被静电场吸向质谱人口，一同随同枯燥或加 热枯燥气体吹送，使液滴外表溶剂蒸发,液滴体积变 小，外表电荷密度变大，当同种电荷之间的库仑斥 力到达雷利极限时，打破外表张力，液滴爆裂为更 小的带电液滴，这一进程不断重复，使终究的液滴 十分细微，呈喷雾状，此刻液滴外表电场很强壮， 使剖析物离子化，带单电荷或多电荷。

  • 质谱仪是依照离子的质荷比(m/z)不同,来别离不同分子量 的分子.测定分子量进行成分和结构剖析.

  首要组成部分: 1.进样部分 2.离子源 3.质量过滤器(剖析器) 4.离子检测器

  MALDI源由氮激光器发生短周期脉冲激光，发生的 多为单电荷离子，功率很高，即便只要很少的样品 也可剖析